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行业知识
如何配制电泳缓冲液
作者:六一生物
发布时间:2024-03-26 09:17:40
点击:
在生物化学实验中,电泳是一种常用的分离和检测核酸、蛋白质等生物大分子的方法。而为了保证电泳的正常进行,我们需要使用到电泳缓冲液。本文将详细介绍如何配制电泳缓冲液,帮助您更好地进行实验操作。
一、电泳缓冲液的作用
电泳缓冲液主要用于稳定pH值,提供离子浓度,以及调节渗透压。这些因素对于电泳结果的准确性至关重要。因此,选择合适的电泳缓冲液非常重要。
二、电泳缓冲液的种类
常见的电泳缓冲液有以下几种:
1. Tris-HCl缓冲液:由Tris(250 mmol/L)、NaOH(150 mmol/L)和HCI(4 mmol/L)按体积比混合而成。适用于DNA和RNA的电泳。
2. 磷酸盐缓冲液:由磷酸盐(250 mmol/L)、KCl(50 mmol/L)、Na2HP04(10 mmol/L)按体积比混合而成。适用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3. 十二烷基硫酸钠(SDS)缓冲液:由Tris(250 mmol/L)、NaOH(150 mmol/L)、H2SO4(20 mmol/L)和SDS(50 g/L)按体积比混合而成。SDS可以改变膜的通透性,提高蛋白质的迁移速度。适用于蛋白质的电泳。
三、电泳缓冲液的配制方法
1. 取适量的溶剂,如去离子水或生理盐水,倒入容器中。
2. 根据所需的电泳缓冲液成分比例,分别称取所需的固体试剂,加入到溶剂中。注意不要将试剂直接加入到水蒸气中,以免造成损失或污染。
3. 用玻璃棒或搅拌器充分搅拌,使试剂完全溶解。
4. 加入适量的超纯水,继续搅拌至溶液透明无色。
5. 用紫外分光光度计检查pH值,如需要可加入适量的酸或碱溶液进行调节。
6. 用滤纸或0.22微米的过滤器过滤溶液,去除不溶物和杂质。
7. 装入密封盒中,存放于冰箱冷藏室内,避免阳光直射和高温环境。
四、注意事项
1. 配制过程中要保持操作台干燥,避免水分残留。
2. 试剂的称量要准确,以保证最终产物的质量。
3. 在搅拌过程中要注意安全,避免试剂溅出或烫伤。
4. 实验结束后要及时清洗设备,避免试剂残留对后续实验造成影响。
通过以上步骤,您可以轻松地配制出所需的电泳缓冲液。希望对您的实验有所帮助!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
如果您对我们的产品有任何问题,欢迎您的来电:400 960 6117
我们的目标是:做生物化学分析仪器行业海尔
一、电泳缓冲液的作用
电泳缓冲液主要用于稳定pH值,提供离子浓度,以及调节渗透压。这些因素对于电泳结果的准确性至关重要。因此,选择合适的电泳缓冲液非常重要。
二、电泳缓冲液的种类
常见的电泳缓冲液有以下几种:
1. Tris-HCl缓冲液:由Tris(250 mmol/L)、NaOH(150 mmol/L)和HCI(4 mmol/L)按体积比混合而成。适用于DNA和RNA的电泳。
2. 磷酸盐缓冲液:由磷酸盐(250 mmol/L)、KCl(50 mmol/L)、Na2HP04(10 mmol/L)按体积比混合而成。适用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3. 十二烷基硫酸钠(SDS)缓冲液:由Tris(250 mmol/L)、NaOH(150 mmol/L)、H2SO4(20 mmol/L)和SDS(50 g/L)按体积比混合而成。SDS可以改变膜的通透性,提高蛋白质的迁移速度。适用于蛋白质的电泳。
三、电泳缓冲液的配制方法
1. 取适量的溶剂,如去离子水或生理盐水,倒入容器中。
2. 根据所需的电泳缓冲液成分比例,分别称取所需的固体试剂,加入到溶剂中。注意不要将试剂直接加入到水蒸气中,以免造成损失或污染。
3. 用玻璃棒或搅拌器充分搅拌,使试剂完全溶解。
4. 加入适量的超纯水,继续搅拌至溶液透明无色。
5. 用紫外分光光度计检查pH值,如需要可加入适量的酸或碱溶液进行调节。
6. 用滤纸或0.22微米的过滤器过滤溶液,去除不溶物和杂质。
7. 装入密封盒中,存放于冰箱冷藏室内,避免阳光直射和高温环境。
四、注意事项
1. 配制过程中要保持操作台干燥,避免水分残留。
2. 试剂的称量要准确,以保证最终产物的质量。
3. 在搅拌过程中要注意安全,避免试剂溅出或烫伤。
4. 实验结束后要及时清洗设备,避免试剂残留对后续实验造成影响。
通过以上步骤,您可以轻松地配制出所需的电泳缓冲液。希望对您的实验有所帮助!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
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