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行业知识
如何在DYcz-27b型圆盘电泳仪上制作高质量的凝胶
作者:六一生物
发布时间:2024-01-10 09:14:30
点击:
凝胶电泳是一种常用的分离生物大分子的方法,广泛应用于生物学、医学等领域。DYcz-27b型圆盘电泳仪作为一种高性能的电泳设备,可以帮助用户快速高效地制作出高质量的凝胶。本文将详细介绍如何在DYcz-27b型圆盘电泳仪上制作高质量的凝胶,帮助读者掌握制作凝胶的基本技巧和注意事项。
一、准备工作
1. 仪器检查:在使用DYcz-27b型圆盘电泳仪之前,首先需要对仪器进行检查,确保其正常运行。包括检查电源、电极、滤纸等部件是否完好,以及仪器的各项功能是否正常。
2. 试剂准备:制作凝胶需要使用到一系列试剂,如琼脂糖、电泳缓冲液、DNA分子量标准品等。在购买试剂时,应选择质量可靠的产品,并按照说明书的要求正确配制试剂。
3. 样品准备:根据实验目的,准备好需要分析的生物样品,如细胞、蛋白质等。样品应尽量保持新鲜,避免受到污染或降解。
二、制作凝胶步骤
1. 称取琼脂糖:根据实验需求,准确称取适量的琼脂糖。通常情况下,每50毫升电泳缓冲液中加入4克琼脂糖。
2. 溶解琼脂糖:将称取好的琼脂糖加入适量的去离子水中,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。注意不要加热琼脂糖,以免破坏其空间结构。
3. 添加电泳缓冲液:将溶解好的琼脂糖倒入电泳槽中,加入适量的电泳缓冲液,调整pH值至7.0左右。然后用磁力搅拌器搅拌均匀。
4. 加入DNA分子量标准品:将预先配置好的DNA分子量标准品加入到电泳槽中,与琼脂糖混合均匀。标准品的浓度一般为1mg/ml,可以根据实际需求适当调整。
5. 过滤:用滤纸将混合物过滤一遍,去除杂质和气泡,使凝胶更加纯净。
6. 转移凝胶:将过滤后的混合物倒入预先准备好的模具(如PCR管)中,压实平整。注意不要让凝胶过厚或过薄,以免影响电泳结果。
7. 固化:将装有凝胶的模具放入恒温箱中,保持一定的温度和时间使凝胶固化。一般来说,固化时间为6-8小时。温度控制在60-65摄氏度之间,可根据实际情况适当调整。
三、注意事项
1. 在制作凝胶过程中,要严格按照试剂和操作步骤进行,避免出现误差。如有疑问,可以参考相关文献或咨询专业人士。
2. 在过滤和转移凝胶时,要注意手法轻柔,避免损坏凝胶结构。同时,确保模具干净无菌,避免交叉污染。
3. 在固化过程中,要密切关注凝胶的状态,避免过早或过晚移除模具。此外,还要注意恒温箱的稳定性,确保温度一致性。
总结:通过以上步骤,我们可以在DYcz-27b型圆盘电泳仪上成功制作出高质量的凝胶。在实际操作过程中,需要注意各项细节,确保实验结果的准确性和可靠性。希望本文能对您有所帮助,祝您实验顺利!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
如果您对我们的产品有任何问题,欢迎您的来电:400 960 6117
我们的目标是:做生物化学分析仪器行业海尔
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一、准备工作
1. 仪器检查:在使用DYcz-27b型圆盘电泳仪之前,首先需要对仪器进行检查,确保其正常运行。包括检查电源、电极、滤纸等部件是否完好,以及仪器的各项功能是否正常。
2. 试剂准备:制作凝胶需要使用到一系列试剂,如琼脂糖、电泳缓冲液、DNA分子量标准品等。在购买试剂时,应选择质量可靠的产品,并按照说明书的要求正确配制试剂。
3. 样品准备:根据实验目的,准备好需要分析的生物样品,如细胞、蛋白质等。样品应尽量保持新鲜,避免受到污染或降解。
二、制作凝胶步骤
1. 称取琼脂糖:根据实验需求,准确称取适量的琼脂糖。通常情况下,每50毫升电泳缓冲液中加入4克琼脂糖。
2. 溶解琼脂糖:将称取好的琼脂糖加入适量的去离子水中,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。注意不要加热琼脂糖,以免破坏其空间结构。
3. 添加电泳缓冲液:将溶解好的琼脂糖倒入电泳槽中,加入适量的电泳缓冲液,调整pH值至7.0左右。然后用磁力搅拌器搅拌均匀。
4. 加入DNA分子量标准品:将预先配置好的DNA分子量标准品加入到电泳槽中,与琼脂糖混合均匀。标准品的浓度一般为1mg/ml,可以根据实际需求适当调整。
5. 过滤:用滤纸将混合物过滤一遍,去除杂质和气泡,使凝胶更加纯净。
6. 转移凝胶:将过滤后的混合物倒入预先准备好的模具(如PCR管)中,压实平整。注意不要让凝胶过厚或过薄,以免影响电泳结果。
7. 固化:将装有凝胶的模具放入恒温箱中,保持一定的温度和时间使凝胶固化。一般来说,固化时间为6-8小时。温度控制在60-65摄氏度之间,可根据实际情况适当调整。
三、注意事项
1. 在制作凝胶过程中,要严格按照试剂和操作步骤进行,避免出现误差。如有疑问,可以参考相关文献或咨询专业人士。
2. 在过滤和转移凝胶时,要注意手法轻柔,避免损坏凝胶结构。同时,确保模具干净无菌,避免交叉污染。
3. 在固化过程中,要密切关注凝胶的状态,避免过早或过晚移除模具。此外,还要注意恒温箱的稳定性,确保温度一致性。
总结:通过以上步骤,我们可以在DYcz-27b型圆盘电泳仪上成功制作出高质量的凝胶。在实际操作过程中,需要注意各项细节,确保实验结果的准确性和可靠性。希望本文能对您有所帮助,祝您实验顺利!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
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