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行业知识
凝胶电泳仪操作流程
作者:六一生物
发布时间:2023-11-19 10:30:35
点击:
凝胶电泳仪是一种常见的实验室设备,它通常用于分析用途,也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子,以下是凝胶电泳仪操作流程介绍:
一、准备试剂
1、准备电泳缓冲液:选择适合实验的电泳缓冲液,如TAE、TBE等,并根据所需的浓度和体积进行配制。
2、准备凝胶混合液:根据所需的凝胶类型和浓度,将凝胶混合液进行配制。
二、操作步骤
1、凝胶板的制作:将凝胶混合液倒入玻璃平板或塑料平板中,使其均匀分布,形成一定厚度的凝胶层。在室温下干燥后,用刀片将凝胶板切割成所需大小的凝胶条。
2、加样及点样:将样品加入到凝胶条的样品孔中,确保样品量适中且均匀分布。根据实验要求,可以使用手动或自动点样器进行点样。
3、电极插头套上湿润的纱布套,纱布应浸在电泳缓冲液中:将电极插头插入电泳槽的电极座中,注意防止电极插头接触溶液。在电极插头周围套上湿润的纱布套,以降低电阻并保持电极湿润。
4、加样后将凝胶板放入电泳槽中:将加好样的凝胶板放入电泳槽中,注意确保凝胶条的一端与电泳槽的负极对齐。
5、连接电源开始电泳:连接电源,设置合适的电压和电流,开始电泳过程。注意观察电泳过程中凝胶条的移动情况,确保电泳正常进行。
6、电泳结束后,断开电源,取出凝胶板:当凝胶条移动到预定的位置或电泳时间达到设定值时,断开电源,取出凝胶板。
7、观察并记录结果:观察凝胶条的分离情况,记录实验结果。可以根据需要使用相应的染色剂对凝胶条进行染色以增强分离效果。
三、注意事项:
1、在操作凝胶电泳仪时,应始终保持凝胶板的清洁,避免杂质影响实验结果。
2、在设置电泳参数时,应根据实验要求进行选择,以确保实验结果的准确性。
3、在操作过程中,应注意安全,避免接触电泳仪的电极等危险部位。
4、在实验结束后,应及时清洗凝胶板和电泳槽,以保持设备的清洁和卫生。
四、结果分析:
根据实验结果,进行数据分析,得出结论。可以比较不同样品在相同凝胶条件下的迁移率或者比较相同样品在不同凝胶条件下的迁移率。根据需要可以进行进一步的数据处理和统计分析。
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一、准备试剂
1、准备电泳缓冲液:选择适合实验的电泳缓冲液,如TAE、TBE等,并根据所需的浓度和体积进行配制。
2、准备凝胶混合液:根据所需的凝胶类型和浓度,将凝胶混合液进行配制。
二、操作步骤
1、凝胶板的制作:将凝胶混合液倒入玻璃平板或塑料平板中,使其均匀分布,形成一定厚度的凝胶层。在室温下干燥后,用刀片将凝胶板切割成所需大小的凝胶条。
2、加样及点样:将样品加入到凝胶条的样品孔中,确保样品量适中且均匀分布。根据实验要求,可以使用手动或自动点样器进行点样。
3、电极插头套上湿润的纱布套,纱布应浸在电泳缓冲液中:将电极插头插入电泳槽的电极座中,注意防止电极插头接触溶液。在电极插头周围套上湿润的纱布套,以降低电阻并保持电极湿润。
4、加样后将凝胶板放入电泳槽中:将加好样的凝胶板放入电泳槽中,注意确保凝胶条的一端与电泳槽的负极对齐。
5、连接电源开始电泳:连接电源,设置合适的电压和电流,开始电泳过程。注意观察电泳过程中凝胶条的移动情况,确保电泳正常进行。
6、电泳结束后,断开电源,取出凝胶板:当凝胶条移动到预定的位置或电泳时间达到设定值时,断开电源,取出凝胶板。
7、观察并记录结果:观察凝胶条的分离情况,记录实验结果。可以根据需要使用相应的染色剂对凝胶条进行染色以增强分离效果。
三、注意事项:
1、在操作凝胶电泳仪时,应始终保持凝胶板的清洁,避免杂质影响实验结果。
2、在设置电泳参数时,应根据实验要求进行选择,以确保实验结果的准确性。
3、在操作过程中,应注意安全,避免接触电泳仪的电极等危险部位。
4、在实验结束后,应及时清洗凝胶板和电泳槽,以保持设备的清洁和卫生。
四、结果分析:
根据实验结果,进行数据分析,得出结论。可以比较不同样品在相同凝胶条件下的迁移率或者比较相同样品在不同凝胶条件下的迁移率。根据需要可以进行进一步的数据处理和统计分析。
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