如何快速且准确地组装 DYCZ-24DN 型迷你双垂直电泳仪？

作者：六一生物发布时间：2025-04-27 09:20:53 点击：

DYCZ-24DN 型迷你双垂直电泳仪是分子生物学实验中常用的设备，其组装效率和密封性直接影响电泳结果。本文从配件检查、组装步骤、防漏技巧到注意事项，提供一套DYCZ-24DN 型迷你双垂直电泳仪标准化操作流程，帮助实验人员快速完成设备搭建并确保实验准确性。

一、DYCZ-24DN 型电泳仪组装前的关键准备

1. 配件检查与清洁

• 核心配件清单：

• 玻璃板（短板磨砂面、长板光滑面）

• 塑料夹子（带箭头标识）

• 电泳槽底座与上盖

• 电极线（红黑接头）

• 梳子（1.0mm/1.5mm 厚度可选）

• 密封条（确保无老化开裂）

• 清洁要求：

• 用去离子水冲洗玻璃板、梳子及电泳槽，避免残留杂质干扰胶凝固或电泳迁移。

• 检查密封条弹性，若硬化需及时更换，防止灌胶时漏液。

2. 环境与工具准备

• 操作台需保持干燥、无震动。

• 准备微量移液器、制胶架、去离子水及制胶试剂（丙烯酰胺、TEMED、APS 等）。

二、分步组装流程与操作技巧

1. 玻璃板安装：避免漏胶的核心步骤

• 对齐方式：

• 短玻璃板（磨砂面朝内）与长玻璃板（光滑面朝内）上下边缘对齐。

• 关键细节：短玻璃板底部需比长板低约 1mm，便于后续灌胶时胶液自然沉降。

• 固定方法：

• 使用塑料夹子从两侧夹紧玻璃板，确保夹子箭头方向朝上，夹紧后无可见缝隙。

• 防漏测试：夹紧后垂直放置，滴加少量去离子水至玻璃板间隙，观察是否渗漏。

2. 电泳槽与电极安装

• 电泳槽组装：

• 将固定好的玻璃板垂直插入电泳槽底座，短玻璃板朝向内侧（靠近电泳槽中心）。

• 密封检查：确保玻璃板底部与电泳槽接触面完全贴合，必要时调整夹子松紧度。

• 电极连接：

• 红色电极（正极）连接至电泳槽外侧（长玻璃板侧），黑色电极（负极）连接至内侧（短玻璃板侧）。

• 注意事项：电极接头需完全插入，避免接触不良导致电压不稳。

3. 梳子插入与胶面预留

• 梳子选择：

• 根据上样量选择梳子厚度（1.0mm 适用于小体积样品，1.5mm 适用于大体积）。

• 插入技巧：

• 将梳子水平插入玻璃板顶部凹槽，确保齿尖距离胶床底部约 1cm。

• 防撕裂设计：梳子插入后轻微左右晃动，避免胶凝固后拔梳困难。

三、灌胶与电泳系统调试

1. 制胶操作规范

• 分离胶与浓缩胶配制：

• 按比例混合丙烯酰胺、缓冲液、TEMED 和 APS，迅速灌入玻璃板间隙。

• 避免气泡：沿玻璃板一侧缓慢倾倒胶液，若有气泡可用移液枪头轻触引导排出。

• 凝固时间控制：

• 分离胶：室温静置 20 分钟（可加入异丙醇压胶加速凝固）。

• 浓缩胶：凝固时间约 10 分钟，凝固后及时拔梳。

2. 缓冲液添加与上样

• 缓冲液分配：

• 内槽（短玻璃板侧）：加入缓冲液至淹没胶面。

• 外槽（长玻璃板侧）：加至液面与槽口平齐。

• 上样技巧：

• 使用微量移液器垂直插入点样孔底部，缓慢推出样品，避免冲散相邻孔道。

3. 预电泳与正式电泳

• 预电泳作用：

• 设置 80V 电压运行 5 分钟，清除胶内残留过硫酸铵，减少条带拖尾。

• 正式电泳参数：

• 浓缩胶阶段：80V 恒压，待溴酚蓝指示剂进入分离胶后切换至 120V。

• 总时长：约 1-1.5 小时（根据目标蛋白分子量调整）。

四、常见问题与解决方案

1. 漏胶或漏缓冲液

• 原因：玻璃板未夹紧、密封条老化、缓冲液液面过高。

• 解决方案：重新调整夹子压力，更换密封条，确保内槽液面不超过胶面。

2. 胶面撕裂或点样孔变形

• 原因：拔梳速度过快、胶未完全凝固。

• 解决方案：拔梳前用去离子水润湿胶面，沿垂直方向缓慢施力。

3. 电泳条带异常

• 可能因素：

• 电极反接（条带反向迁移）。

• 胶浓度与目标蛋白分子量不匹配。

• 电压过高导致发热变形。

五、安全与维护建议

1. 安全操作：

• 电泳时盖好安全盖，避免接触缓冲液（含毒性物质如 SDS）。

• 实验结束后及时关闭电源，清洁电极接头防止腐蚀。

2. 设备维护：

• 长期不用时拆卸玻璃板，干燥存放。

• 定期检查密封条和塑料夹子弹性，避免老化失效。

结语：DYCZ-24DN 型电泳仪的快速组装依赖于规范化的操作流程和细节把控。通过配件检查、精准对齐、密封性测试及参数优化，可显著提升实验效率与结果可靠性。建议实验人员首次操作时对照说明书逐步练习，熟练掌握后单次组装时间可缩短至 10 分钟以内。

本文由北京六一生物编辑整理。

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