DYCP - 31A型电泳仪电泳结果异常？

作者：六一生物发布时间：2025-04-01 09:07:30 点击：

DYCP - 31A型电泳仪在核酸与蛋白质的分离鉴定实验里，是不可或缺的设备。然而，不少实验人员在使用过程中，会遭遇电泳结果异常的问题，这些问题不仅干扰实验的正常推进，还可能导致错误的研究结论。接下来，本文将深入分析DYCP - 31A型电泳仪结果异常的原因，并给出针对性的解决策略。

一、样品层面引发的异常

样品浓度问题

1. 条带模糊拖尾：当样品浓度过高时，大量生物大分子涌入加样孔，分子间相互拥挤，无法正常迁移，导致条带模糊、拖尾。在核酸电泳实验中，如果PCR产物浓度超过200ng/μL，就容易出现这种情况。此时，使用分光光度计或核酸定量仪准确测定样品浓度，用缓冲液对高浓度样品进行梯度稀释，将其浓度控制在50 - 200ng/μL范围内，便能改善条带质量。
2. 条带信号微弱：样品浓度过低，可供分离的生物大分子数量稀少，条带信号自然微弱，甚至难以检测。在蛋白质电泳实验中，若蛋白样品浓度低于1mg/mL，就可能出现这种现象。可通过浓缩样品来提高浓度，常用的浓缩方法有超滤、沉淀等。

样品纯度与完整性问题

1. 杂质干扰：样品中若含有多糖、核酸酶、蛋白酶等杂质，会与目标生物大分子相互作用，干扰其在凝胶中的迁移。比如，核酸样品中残留的蛋白质杂质，会使核酸条带出现不规则的弥散。采用柱层析、透析等方法对样品进行纯化，去除杂质，能有效解决这一问题。
2. 样品降解：样品在储存或处理过程中，可能因温度、pH值等因素发生降解。例如，RNA样品在常温下容易被RNA酶降解，导致电泳条带呈现弥散状。为避免样品降解，需严格控制样品的储存条件，如将核酸样品储存在-20℃或-80℃，蛋白质样品根据其稳定性选择合适的储存温度，同时在操作过程中使用无酶的耗材。

二、凝胶相关问题

凝胶浓度不匹配

1. 大分子分离不佳：若凝胶浓度过高，孔径变小，大分子物质难以通过，迁移受阻，条带拖尾。在分离大于5kb的DNA片段时，若使用1.5%以上的琼脂糖凝胶，就可能出现这种情况。应根据目标生物大分子的大小，选择合适的凝胶浓度，分离较大的DNA片段，宜使用0.8% - 1%的琼脂糖凝胶。
2. 小分子分辨率低：凝胶浓度过低，孔径过大，小分子物质在凝胶中扩散过快，无法有效分离，分辨率降低。在分离小于500bp的核酸片段时，使用0.8%以下的琼脂糖凝胶，就可能导致分辨率下降。此时，应选用1.5% - 2%的琼脂糖凝胶，以提高小分子物质的分辨率。

凝胶制备缺陷

1. 未充分溶解：凝胶制备过程中，若琼脂糖或聚丙烯酰胺未充分溶解，凝胶中会存在未溶解的颗粒，阻碍生物大分子的迁移，使条带扭曲。在溶解琼脂糖时，采用低功率（300 - 400W）间歇性加热，每次15 - 30秒，期间不断搅拌，确保其充分溶解。
2. 气泡残留：凝胶中的气泡会改变电场分布，使生物大分子的迁移路径发生改变，导致条带异常。在倒胶前，让凝胶溶液静置一段时间，使气泡自然逸出，也可用吹风机的冷风档吹去表面气泡，或用牙签挑破气泡。

三、仪器及操作问题

电泳参数设置不当

1. 电压过高：过高的电压会使电泳过程产生过多热量，导致凝胶温度升高，分子热运动加剧，条带扩散。在核酸电泳中，若电压超过150V，就可能出现这种情况。根据实验要求，合理设置电压，一般起始电压可设置在100 - 120V，随着电泳的进行，再适当调整。
2. 电泳时间过长：电泳时间过长，小分子物质会过度迁移，条带扩散，分辨率降低。在核酸电泳中，当溴酚蓝指示剂迁移至凝胶长度的3/4以上时，若仍不停止电泳，就可能导致条带扩散。通过预实验确定最佳的电泳时间，当指示剂迁移至合适位置时，及时停止电泳。

加样与电极连接问题

1. 加样失误：加样时移液器操作不准确，吸取的样品量不一致，会导致条带强度差异较大。加样时枪头插入过深，可能会刺破凝胶，影响样品迁移。在加样前，校准移液器，加样时将枪头垂直缓慢插入凝胶孔底部，轻轻推动活塞，注入样品。
2. 电极连接异常：电极连接不紧密或正负极接反，会使电流无法正常传导，电泳无法进行，或使生物大分子向错误的方向迁移。在电泳前，仔细检查电极的连接情况，确保电极与电泳槽连接紧密，正负极连接正确。

通过对DYCP - 31A型电泳仪电泳结果异常原因的深入剖析，实验人员在遇到问题时，可迅速定位并解决，从而提高实验的成功率，获得准确可靠的实验结果。在实验过程中，要严格遵守操作规程，不断总结经验，提升实验技能。若你在实验过程中遇到其他问题或有相关经验，欢迎在评论区留言分享。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：