DYCP - 31DN电泳结果异常分析-90%用户忽视的4个细节

作者：六一生物发布时间：2025-03-12 09:21:29 点击：

在分子生物学实验中，DYCP - 31DN电泳仪是进行生物大分子分离与分析的重要工具。然而，许多用户在使用过程中会遭遇电泳结果异常的情况，却常常找不到原因。今天，我们就来深入剖析DYCP - 31DN电泳仪那些90%用户容易忽视的4个导致电泳结果异常的细节。

细节一：样品处理不当

1、样品纯度不足

在准备样品时，若杂质去除不彻底，这些杂质会干扰生物大分子在电场中的迁移。比如在蛋白质样品中，若存在未去除干净的核酸、多糖等杂质，它们可能与蛋白质结合，改变蛋白质的电荷性质和分子大小，使得蛋白质在电泳时的迁移速率发生偏差，最终导致条带模糊或出现杂带。解决办法是采用更精细的样品纯化方法，如对于蛋白质样品，可利用柱层析、超滤等技术进一步去除杂质；对于核酸样品，通过酚 - 氯仿抽提、乙醇沉淀等步骤提高纯度。

2、样品浓度异常

样品浓度过高或过低都不利于电泳结果。浓度过高，条带会出现过载现象，表现为条带变宽、拖尾甚至相互重叠，难以准确分辨各个条带。以核酸电泳为例，当DNA样品浓度过高时，在凝胶上的条带会显得非常浓密且边界不清晰。而浓度过低，则条带信号微弱，可能无法被检测到。用户在实验前应使用分光光度计、酶标仪等仪器准确测定样品浓度，并根据实验要求和凝胶的检测灵敏度，合理调整样品浓度。例如，对于蛋白质SDS - PAGE电泳，一般建议将蛋白质样品浓度控制在合适的范围内，如0.5 - 2mg/mL。

细节二：凝胶制备瑕疵

1、凝胶浓度不准确

凝胶浓度是影响生物大分子迁移的关键因素之一。如果在制备凝胶时，试剂称量不准确或混合不均匀，导致凝胶浓度与预期不符，就会严重影响电泳结果。对于蛋白质电泳，若要分离小分子蛋白质，通常需要较高浓度（如12% - 15%）的聚丙烯酰胺凝胶，其较小的孔径能有效阻碍小分子蛋白质的迁移，实现良好的分离效果；而对于大分子蛋白质，则应选择较低浓度（如7.5% - 10%）的凝胶。在核酸电泳中，分离大片段DNA时，0.8% - 1%的琼脂糖凝胶较为合适；分离小片段核酸时，需将琼脂糖凝胶浓度提高至1.5% - 2%。用户务必严格按照配方准确称量各种试剂，并充分搅拌均匀，确保凝胶浓度精准无误。

2、凝胶凝固缺陷

凝胶在凝固过程中若出现问题，如存在气泡、凝固不均匀等，也会导致电泳结果异常。气泡在凝胶中形成空洞，生物大分子在迁移过程中遇到气泡会改变迁移路径，使条带扭曲、变形或模糊。此外，凝胶凝固不均匀会造成局部孔径大小不一致，同样影响生物大分子的迁移。在制备凝胶时，要注意避免产生气泡，若不慎产生，可将凝胶溶液静置一段时间，让气泡自然逸出，或者使用吹风机的冷风档轻轻吹去表面气泡。同时，确保凝胶在适宜的温度和环境下均匀凝固，避免温度波动或震动干扰凝胶凝固过程。

细节三：电泳条件偏差

1、电压与电流设置不合理

电压和电流的大小直接影响生物大分子在凝胶中的迁移速度。电压过高，生物大分子迁移过快，条带扩散严重，分辨率降低，难以准确区分不同的生物大分子条带。相反，电压过低，电泳时间过长，条带同样会扩散，而且可能因电场力不足，导致一些生物大分子无法有效分离。在蛋白质SDS - PAGE电泳中，初始电压可设置在80 - 100V，待样品进入分离胶后，将电压提高到120 - 150V较为合适。在核酸电泳中，电压一般控制在5 - 10V/cm凝胶长度。同时，要密切关注电流的变化，确保电流稳定，若电流出现波动，可能是电极接触不良、缓冲液离子浓度不均匀等原因，需及时排查并解决。

2、电泳时间把控失误

电泳时间过长，条带会过度迁移，出现扩散、拖尾现象，甚至可能跑出凝胶范围，无法得到完整的电泳图谱。而电泳时间过短，生物大分子未能充分分离，条带分辨率低，难以准确判断生物大分子的大小和数量。用户应通过预实验确定合适的电泳时间，根据样品性质、凝胶浓度等因素进行调整。一般来说，蛋白质SDS - PAGE电泳时间在1 - 2小时，核酸电泳时间在0.5 - 2小时之间，但具体时间需根据实际情况灵活确定。

细节四：仪器状态不佳

1、电极问题

电极在电泳过程中起着传导电流的重要作用。若电极表面出现腐蚀、氧化现象，会增加电阻，使电流传导不均匀，导致生物大分子迁移异常，条带出现扭曲、模糊等问题。对于铂金丝电极，每次使用后应仔细检查，若发现表面有黑色或棕色的氧化物，可使用砂纸轻轻打磨，去除氧化物，然后用蒸馏水彻底冲洗干净，确保电极表面洁净且导电良好。若电极腐蚀严重，已无法通过打磨修复，需及时更换新电极。同时，要确保电极与电泳仪连接牢固，电极位置正确，避免因接触不良或位置偏差影响电场均匀性。

2、缓冲液问题

缓冲液在电泳中维持着稳定的pH值和离子强度，对电泳结果至关重要。使用被污染或变质的缓冲液，其离子浓度、pH值等性质会发生改变，影响生物大分子的迁移。例如，缓冲液长时间放置后，可能会吸收空气中的二氧化碳，导致pH值下降，或者受到微生物污染，使其性能发生变化。用户应定期更换新鲜的缓冲液，确保缓冲液的质量。在使用前，仔细检查缓冲液是否有沉淀、变色等异常现象，若有则应立即更换。同时，要注意缓冲液在电泳槽中的液位，液位过低会影响电场均匀性，导致电泳结果异常，应确保缓冲液液位符合仪器要求。

DYCP - 31DN电泳仪电泳结果异常往往是由多个容易被忽视的细节导致的。通过关注样品处理、凝胶制备、电泳条件以及仪器状态这四个方面的细节，用户能够有效减少电泳结果异常的情况，提高实验的成功率和准确性。希望广大科研工作者在今后的实验中，能够重视这些细节，让DYCP - 31DN电泳仪更好地服务于科研工作。如果您在实验过程中遇到其他电泳结果异常问题，欢迎在评论区留言分享，我们一起探讨解决方案。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：