DYCZ - 24F型双垂直电泳仪操作指南

作者：六一生物发布时间：2025-03-11 09:05:55 点击：

在分子生物学实验领域，DYCZ - 24F型双垂直电泳仪是分离和分析生物大分子的得力助手。然而，在操作过程中，实验人员常常会遇到各种问题，影响实验的顺利进行和结果的准确性。今天，我们就来全面解析DYCZ - 24F型双垂直电泳仪10个常见问题及其解决方案，帮助大家更好地使用这款仪器。

一、凝胶制备问题

（一）凝胶凝固不完全

1. 问题表现：凝胶在规定时间内未完全凝固，呈现软塌或部分液态状态。
2. 原因分析：可能是引发剂（如过硫酸铵）和催化剂（如TEMED）的用量不准确，或者聚合温度过低。此外，凝胶溶液搅拌不均匀，导致局部浓度差异，也会影响凝固效果。
3. 解决方案：严格按照配方准确量取引发剂和催化剂，确保其比例合适。在冬季等低温环境下，可适当延长凝胶聚合时间或提高聚合温度，比如将凝胶放置在37℃的恒温箱中促进凝固。搅拌凝胶溶液时，使用磁力搅拌器并充分搅拌，使溶液均匀混合。

（二）凝胶出现气泡

1. 问题表现：凝胶中存在大小不一的气泡，影响生物大分子的迁移路径。
2. 原因分析：倒胶时速度过快，或者凝胶溶液在搅拌过程中混入了空气，未能及时排出。
3. 解决方案：倒胶时将移液器枪头深入到制胶模具底部，缓慢匀速地注入凝胶溶液，避免产生气泡。若发现有气泡，可使用玻璃棒轻轻戳破或用吹风机的冷风档将气泡吹走。在搅拌凝胶溶液后，可将溶液静置一段时间，让气泡自然逸出。

二、上样问题

（一）上样量过多或过少

1. 问题表现：上样量过多导致条带拖尾、变形，甚至溢出泳道；上样量过少则条带信号微弱，难以观察。
2. 原因分析：对样品浓度估计不准确，或者移液器使用不熟练，导致加样量出现偏差。
3. 解决方案：使用分光光度计等仪器准确测定样品浓度，根据实验要求和凝胶的检测灵敏度，合理调整上样量。在使用移液器前，仔细检查其量程和精度，进行多次练习，确保加样量准确无误。

（二）样品在孔内扩散

1. 问题表现：上样后样品在加样孔内不能保持集中，向周围扩散。
2. 原因分析：样品浓度过低，粘性不足；加样速度过快，冲击力使样品扩散；加样孔损坏，无法有效容纳样品。
3. 解决方案：若样品浓度过低，可通过浓缩等方式提高浓度。加样时放慢速度，将移液器枪头垂直缓慢插入加样孔底部，轻轻推动活塞。检查加样孔是否有损坏，如有问题及时更换凝胶板。

三、电泳过程问题

（一）电流不稳定

1. 问题表现：电泳过程中电流忽高忽低，影响生物大分子的迁移速度。
2. 原因分析：电源接触不良，电极腐蚀，缓冲液浓度不均匀或污染，都可能导致电流不稳定。
3. 解决方案：检查电源插头与插座的连接，确保接触良好。观察电极表面是否有腐蚀现象，如有则进行清洁或更换。重新配制缓冲液，确保其浓度均匀且无污染。

（二）电压过高或过低

1. 问题表现：电压过高使条带迁移过快，分辨率降低；电压过低则导致电泳时间过长，条带扩散。
2. 原因分析：可能是电泳仪的电压设置错误，或者仪器本身的电压调节功能出现故障。
3. 解决方案：根据凝胶的类型、厚度和样品的性质，参考实验手册合理设置电压。若怀疑仪器电压调节功能异常，联系专业维修人员进行检修。

四、结果分析问题

（一）条带模糊不清

1. 问题表现：电泳结束后，条带边缘不清晰，呈现模糊状态。
2. 原因分析：样品降解，凝胶浓度不合适，电泳时间过长或温度过高，都可能导致条带模糊。
3. 解决方案：在样品制备过程中，采取措施防止样品降解，如加入蛋白酶抑制剂（针对蛋白质样品）或核酸酶抑制剂（针对核酸样品）。根据生物大分子的大小选择合适的凝胶浓度。通过预实验确定最佳的电泳时间和温度。

（二）条带扭曲变形

1. 问题表现：条带呈现弯曲、扭曲的形状，而非直线。
2. 原因分析：凝胶板安装不平整，电场不均匀，或者样品中存在杂质干扰迁移。
3. 解决方案：重新安装凝胶板，确保其平整且与电极平行。检查电极是否清洁、安装是否正确，保证电场均匀。对样品进行纯化处理，去除杂质。

（三）无条带出现

1. 问题表现：电泳结束后，凝胶上未出现任何条带。
2. 原因分析：样品制备过程中出现失误，如样品丢失、未成功提取；上样量过少或未成功上样；电泳条件设置错误，导致生物大分子未发生迁移。
3. 解决方案：重新检查样品制备过程，确保样品的完整性和浓度。仔细检查上样操作，确认加样量和加样位置正确。核对电泳条件，如电压、时间等是否符合实验要求。

（四）条带拖尾

1. 问题表现：条带后端呈现拖尾现象，影响对生物大分子大小的判断。
2. 原因分析：样品浓度过高，蛋白质或核酸降解，凝胶聚合不完全，都可能导致条带拖尾。
3. 解决方案：适当稀释样品，降低浓度。在样品制备和保存过程中，注意防止降解。重新制备凝胶，确保其充分聚合。

DYCZ - 24F型双垂直电泳仪的操作需要注意诸多细节，通过对这10个常见问题的分析和解决，希望能帮助实验人员更好地掌握仪器的使用技巧，提高实验的成功率和结果的准确性。如果你在操作过程中遇到其他问题，欢迎在评论区留言分享，我们一起探讨解决方案。

本文由北京六一生物编辑整理。

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