如何避免DYCZ - 26C型双向电泳仪跑胶时出现气泡？

作者：六一生物发布时间：2025-02-26 09:20:08 点击：

在使用DYCZ - 26C型双向电泳仪进行跑胶实验时，气泡的出现是一个常见且令人头疼的问题。这些气泡不仅会干扰样品的正常迁移，导致条带变形、模糊，影响实验结果的准确性，还可能暗示着实验操作或仪器状态存在问题。下面将从多个方面为你详细介绍DYCZ - 26C型双向电泳仪避免跑胶时出现气泡的方法。

一、凝胶制备阶段

1、准确混合试剂

- 控制搅拌速度：在配制凝胶溶液时，使用磁力搅拌器搅拌试剂。将搅拌速度控制在适中水平，一般以溶液能够平稳流动但不产生剧烈漩涡为宜。如果搅拌速度过快，会像快速搅拌一杯水那样，使大量空气卷入溶液中形成气泡。例如，当搅拌速度超过 500 转/分钟时，就容易出现这种情况。

- 充分溶解成分：对于凝胶中的各种成分，如丙烯酰胺、双丙烯酰胺、缓冲液等，要确保它们充分溶解。以琼脂糖凝胶为例，将琼脂糖加入缓冲液后，需用微波炉或加热磁力搅拌器加热，期间要不断观察溶液状态，直到琼脂糖完全溶解，溶液澄清透明，无肉眼可见的颗粒。加热过程中可以适当搅拌，但要注意避免溶液溢出。

2、有效脱气处理

- 静置排气：凝胶溶液配制好后，将其放置在平稳的台面上静置一段时间，让溶液中的小气泡自然上浮并排出。静置时间一般为 10 - 15 分钟，具体时间可根据溶液的体积和搅拌情况适当调整。
- 真空脱气：对于对气泡要求较高的实验，可使用真空脱气装置对凝胶溶液进行脱气处理。将凝胶溶液放入真空容器中，开启真空泵，使容器内形成一定的真空度，降低溶液表面的压力，促使溶解在溶液中的气体逸出。一般真空度可控制在 - 0.08MPa 至 - 0.1MPa 之间，脱气时间为 5 - 10 分钟。

二、灌胶操作环节

1、选择合适的灌胶工具

- 使用滴管或移液器：在灌胶时，建议使用滴管或移液器将凝胶溶液缓慢加入制胶模具中。滴管或移液器能够精确控制溶液的流速和流量，避免溶液快速冲击模具底部和侧壁，减少空气的卷入。
- 灌胶速度要均匀：灌胶过程中，要保持匀速将溶液加入模具，避免速度忽快忽慢。一般来说，每秒钟加入的溶液量以 0.1 - 0.2 毫升为宜。如果灌胶速度过快，溶液会在模具中形成较大的冲击力，使空气被卷入溶液中形成气泡。

2、正确插入加样孔梳

- 缓慢垂直插入：当凝胶溶液灌至适当高度后，将加样孔梳缓慢、垂直地插入凝胶溶液中。插入过程中要避免梳齿与模具壁接触，防止产生气泡。如果插入角度倾斜，会使空气在梳齿周围积聚，形成气泡。
- 避免晃动：加样孔梳插入后，要保持其稳定，避免晃动。晃动会使已经形成的凝胶结构被破坏，导致气泡产生。在等待凝胶凝固的过程中，尽量不要触碰加样孔梳和模具。

三、缓冲液与电极处理

1、合理配制缓冲液

- 确保成分准确：按照实验要求准确配制缓冲液，使用高质量的试剂和去离子水。缓冲液的浓度和 pH 值对电泳效果有重要影响，不准确的配制可能会导致电场分布不均匀，产生气泡。例如，在配制 Tris - 甘氨酸缓冲液时，要严格按照配方称取 Tris、甘氨酸和 SDS 等试剂，并使用 pH 计准确调节 pH 值至 8.3。
- 去除缓冲液中的气泡：配制好的缓冲液在使用前可进行简单的脱气处理，如将缓冲液放入超声清洗器中超声 5 - 10 分钟，使其中的微小气泡逸出。

2、维护电极状态

- 清洁电极表面：定期清洁电极，去除表面的氧化层和污垢。可以使用稀盐酸或稀硝酸浸泡电极 5 - 10 分钟，然后用去离子水冲洗干净。干净的电极表面能够保证良好的导电性，避免因电极问题导致气泡产生。
- 正确安装电极：安装电极时，要确保电极与电泳槽的连接紧密，电极完全浸入缓冲液中。如果电极安装不当，会使电流分布不均匀，在电极附近产生气泡。

四、环境与仪器控制

1、稳定实验环境

- 控制温度和湿度：将实验环境的温度控制在 20 - 25℃，湿度控制在 40% - 60%。温度过高或过低都会影响凝胶的凝固速度和性质，湿度太大可能会使凝胶表面吸收水分，导致气泡产生。可以使用空调和除湿机来调节实验环境的温湿度。
- 避免振动和气流：在跑胶过程中，要避免实验台受到振动和周围有明显的气流。振动会使凝胶中的气泡移动或产生新的气泡，气流可能会影响电场的稳定性。因此，要将电泳仪放置在平稳的实验台上，远离通风口和风扇等设备。

2、检查仪器状态

- 检测电源稳定性：使用前检查电泳仪的电源输出是否稳定。可以使用万用表测量电源的电压和电流，确保其在规定的范围内波动。不稳定的电源会导致电场不稳定，产生气泡。
- 检查电泳槽密封性：检查电泳槽的密封性能，确保槽体和盖子之间密封良好，没有缓冲液泄漏的情况。如果电泳槽密封不良，会使空气进入槽内，在电场作用下产生气泡。

通过以上对凝胶制备、灌胶操作、缓冲液与电极处理以及环境与仪器控制等方面的严格把控，可以有效避免DYCZ - 26C型双向电泳仪跑胶时出现气泡，提高实验的成功率和结果的准确性。在实际操作中，要养成良好的实验习惯，注意各个环节的细节，不断总结经验，以获得更好的实验效果。如果在实验过程中仍然遇到气泡问题，可以根据具体情况逐步排查原因，及时解决。

本文由北京六一生物编辑整理。

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