DYCZ - 24K双板垂直电泳仪制胶总有气泡怎么消除

作者：六一生物发布时间：2025-02-09 09:10:01 点击：

在运用DYCZ - 24K双板垂直电泳仪开展实验时，制胶环节至关重要。然而，不少实验人员常常被制胶时总有气泡这一问题困扰。这些气泡不仅影响凝胶的质量，还会干扰后续的电泳实验结果，让人头疼不已。别担心，接下来我们就深入剖析DYCZ - 24K双板垂直电泳仪制胶产生气泡的原因，并分享简单有效的消除方法。

一、制胶产生气泡的常见原因

1. 溶液混合不均匀：在配制凝胶溶液时，若各试剂未能充分混合，就容易产生气泡。例如，在制备聚丙烯酰胺凝胶时，丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、缓冲液等成分若搅拌不充分，溶液中会存在局部浓度差异，这会影响聚合反应的均匀性，导致气泡产生。而且，未完全溶解的溶质颗粒周围也容易吸附气体，形成气泡。

2. 试剂过期或变质：使用过期或变质的试剂，也可能是气泡产生的原因。比如，过硫酸铵（APS）是引发聚合反应的关键试剂，若其过期，分解产生的自由基数量不足，不仅会使聚合反应变慢，还可能在溶液中产生微小气泡。这些气泡在凝胶形成过程中被困在其中，影响凝胶质量。

二、操作不当

1. 搅拌速度过快：在搅拌凝胶溶液时，速度过快会使空气大量卷入溶液中。快速搅拌形成的漩涡会将空气包裹其中，即使后续静置，这些气泡也难以完全排出。例如，使用磁力搅拌器时，若转速设置过高，溶液剧烈翻滚，就会产生大量气泡。

2. 灌胶方式不正确：灌胶过程中，如果移液器操作不当，也会引入气泡。比如，将移液器枪头插入溶液过深，再快速吸取溶液，会使溶液产生扰动，形成气泡。而且，在将凝胶溶液注入模具时，若流速过快，溶液冲击模具壁，也会导致气泡产生。

三、环境因素

1. 温度和气压变化：环境温度和气压的波动会对凝胶溶液产生影响。当温度突然降低时，气体在溶液中的溶解度减小，原本溶解在溶液中的气体就会析出形成气泡。同样，气压降低也会导致气体溶解度下降，引发气泡产生。例如，在夏天从温度较高的室外进入开着空调的实验室制胶，环境温度的骤变可能使凝胶溶液产生气泡。

2. 灰尘和杂质：实验室环境中的灰尘和杂质若进入凝胶溶液，可能成为气泡的凝结核。这些微小的颗粒表面能吸附气体，从而促进气泡的形成。如果实验室通风不良，灰尘较多，制胶时气泡产生的概率就会增加。

四、气泡对电泳实验的影响

1. 形成空洞：制胶过程中产生的气泡在凝胶聚合后会形成空洞。这些空洞破坏了凝胶的连续性和均匀性，使得凝胶的结构强度降低。在电泳过程中，样本分子在经过这些空洞时，迁移路径会发生改变，导致条带变形或模糊。

2. 影响孔径分布：气泡的存在还会改变凝胶的孔径分布。凝胶的孔径大小对于样本分子的分离起着关键作用，不均匀的孔径分布会使不同分子量的样本分子无法按照预期的速度和路径迁移，从而影响电泳的分辨率和准确性。

五、干扰电泳结果

1. 条带异常：由于凝胶结构和孔径分布受到气泡的影响，样本在电泳时无法正常迁移，会导致电泳条带出现扭曲、断裂或缺失等异常现象。例如，蛋白质条带可能会出现分叉、模糊不清的情况，这使得对蛋白质分子量和含量的分析变得困难。

2. 数据偏差：不准确的电泳条带会导致实验数据出现偏差，无法真实反映样本的情况。这可能会误导后续的研究方向，使科研人员得出错误的结论，浪费大量的时间和资源。

六、一招消除气泡的方法：真空脱气法

1. 设备准备：需要一台真空干燥器和真空泵。真空干燥器要确保密封性良好，真空泵的抽气能力要满足实验需求。此外，还需要准备一个合适的容器来盛放凝胶溶液，容器的口径要能与真空干燥器匹配。

2. 溶液准备：按照正常的制胶流程配制好凝胶溶液，但不要加入引发剂（如APS和TEMED）。在加入引发剂之前进行脱气操作，避免在真空环境下引发聚合反应。

七、操作步骤

1. 转移溶液：将配制好的凝胶溶液小心地倒入准备好的容器中，溶液量不要超过容器容积的三分之二，以免在抽气过程中溶液溢出。

2. 放入真空干燥器：将装有凝胶溶液的容器放入真空干燥器中，确保容器放置平稳。然后，关闭真空干燥器的盖子，连接好真空泵的抽气管道。

3. 抽气脱气：启动真空泵，开始抽气。随着真空度的增加，凝胶溶液中的气泡会逐渐冒出。在抽气过程中，要密切观察溶液的状态，不要让溶液剧烈沸腾，以免产生过多泡沫。一般抽气5 - 10分钟，当溶液中不再有明显气泡冒出时，即可停止抽气。

4. 取出溶液并添加引发剂：缓慢打开真空干燥器的放气阀，使空气缓慢进入，待内外气压平衡后，打开盖子取出容器。迅速向溶液中加入引发剂，轻轻搅拌均匀，然后按照正常的灌胶流程进行操作。

八、其他辅助消除气泡的方法

1. 操作方法：将配制好的凝胶溶液放入超声清洗器中，设置适当的功率和时间进行超声处理。超声的高频振动可以使溶液中的气泡破裂并排出。一般超声处理2 - 3分钟即可，但要注意超声时间不宜过长，以免溶液温度升高影响试剂活性。

2. 注意事项：超声处理时，要确保容器密封良好，避免溶液泄漏。同时，超声结束后要尽快进行灌胶操作，防止气泡再次产生。

九、静置排气

1. 操作方法：在灌胶前，将配制好的凝胶溶液静置一段时间，让溶液中的气泡自然上升到表面并破裂。静置时间一般为10 - 15分钟，具体时间可根据溶液的量和气泡的多少进行调整。

2. 注意事项：静置过程中要保持环境安静，避免震动，以免干扰气泡的排出。此外，静置时间过长可能会导致溶液中的成分发生沉淀，影响凝胶质量，所以要把握好静置时间。

当使用DYCZ - 24K双板垂直电泳仪制胶总有气泡时，通过采用真空脱气法，并结合超声处理和静置排气等辅助方法，能够有效消除气泡，提高凝胶质量，确保电泳实验的顺利进行。在实验过程中，注重每一个细节，严格把控制胶环节，是获得准确实验结果的关键。

本文由北京六一生物编辑整理。

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