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行业知识
电泳仪的分离效果受到多种因素的影响
作者:
发布时间:2023-10-30 10:25:54
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1.样品性质:样品的性质可以影响电泳分离效果。不同分子量的样品在电泳中的迁移速度不同,带有不同电荷的样品在电场中的迁移方向和速度也会有所不同。
2.电场强度:电场强度是电泳分离的重要数之一。在一定范围内,电场强度越高,带电粒子的迁移速度越快,分离效果越好。然而,过高的电场强度可能会导致样品带电,产生电渗现象,影响分离效果。
3.电泳介质:电泳介质是影响电泳分离效果的另一个重要因素。不同的电泳介质具有不同的孔隙大小和电荷性质,适用于不同的样品类型和分离需求。选择合适的电泳介质可以提高分离效果。
4.温度:温度也是影响电泳分离效果的因素之一。在一定范围内,升高温度可以加快分子的迁移速度,提高分离效果。然而,过高的温度可能会导致样品变性或破坏电泳介质的结构,影响分离效果。
5.缓冲液:缓冲液可以维持电泳过程中的pH值稳定,并保护样品和电泳介质不受电场直接作用而破坏。选择合适的缓冲液可以提高电泳仪的分离效果。
6.支持介质的筛孔:支持介质的筛孔大小对待分离生物大分子的电泳迁移速度有明显的影响。在筛孔大的介质中泳动速度快,反之,则泳动速度慢。
7.电渗:液体在电场中,对于固体支持介质的相对移动,称为电渗现象。由于支持介质表面可能会存在一些带电基团,如滤纸表面通常有一些羧基,琼脂可能会含有一些硫酸基,而玻璃表面通常有Si-OH基团等等。这些基团电离后会使支持介质表面带电,吸附一些带相反电荷的离子,在电场的作用下向电极方向移动,形成介质表面溶液的流动,这种现象就是电渗。在pH值高于3时,玻璃表面带负电,吸附溶液中的正电离子,引起玻璃表面附近溶液层带正电,在电场的作用下,向负极迁移,带动电极液产生向负极的电渗流。如果电渗方向与待分离分子电泳方向相同,则加快电泳速度;如果相反,则降低电泳速度。
综上所述,为了提高电泳仪的分离效果,需要根据实验条件和需求选择合适的因素进行综合考虑。同时,还需要注意实验操作规范和设备维护保养,以保证电泳仪的正常运行和延长使用寿命。
2.电场强度:电场强度是电泳分离的重要数之一。在一定范围内,电场强度越高,带电粒子的迁移速度越快,分离效果越好。然而,过高的电场强度可能会导致样品带电,产生电渗现象,影响分离效果。
3.电泳介质:电泳介质是影响电泳分离效果的另一个重要因素。不同的电泳介质具有不同的孔隙大小和电荷性质,适用于不同的样品类型和分离需求。选择合适的电泳介质可以提高分离效果。
4.温度:温度也是影响电泳分离效果的因素之一。在一定范围内,升高温度可以加快分子的迁移速度,提高分离效果。然而,过高的温度可能会导致样品变性或破坏电泳介质的结构,影响分离效果。
5.缓冲液:缓冲液可以维持电泳过程中的pH值稳定,并保护样品和电泳介质不受电场直接作用而破坏。选择合适的缓冲液可以提高电泳仪的分离效果。
6.支持介质的筛孔:支持介质的筛孔大小对待分离生物大分子的电泳迁移速度有明显的影响。在筛孔大的介质中泳动速度快,反之,则泳动速度慢。
7.电渗:液体在电场中,对于固体支持介质的相对移动,称为电渗现象。由于支持介质表面可能会存在一些带电基团,如滤纸表面通常有一些羧基,琼脂可能会含有一些硫酸基,而玻璃表面通常有Si-OH基团等等。这些基团电离后会使支持介质表面带电,吸附一些带相反电荷的离子,在电场的作用下向电极方向移动,形成介质表面溶液的流动,这种现象就是电渗。在pH值高于3时,玻璃表面带负电,吸附溶液中的正电离子,引起玻璃表面附近溶液层带正电,在电场的作用下,向负极迁移,带动电极液产生向负极的电渗流。如果电渗方向与待分离分子电泳方向相同,则加快电泳速度;如果相反,则降低电泳速度。
综上所述,为了提高电泳仪的分离效果,需要根据实验条件和需求选择合适的因素进行综合考虑。同时,还需要注意实验操作规范和设备维护保养,以保证电泳仪的正常运行和延长使用寿命。
- 上一个:电泳仪的原理及分离效果
- 下一个:电泳仪的原理及主要用途
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