DYCZ - 24DH 型双板垂直电泳仪凝胶与梳子适配不佳？

作者：六一生物发布时间：2024-12-31 09:26:26 点击：

在分子生物学实验中，DYCZ - 24DH 型双板垂直电泳仪是常用的分离分析工具，然而，凝胶与梳子适配不佳的问题却常常困扰着使用者，影响实验的顺利进行和结果的准确性。今天，我们就来深入探讨DYCZ - 24DH 型双板垂直电泳仪这一问题的成因及解决办法。

一、凝胶与梳子适配不佳的影响

当凝胶与梳子适配出现问题时，首先会影响样品的加样效果。如果梳子与凝胶之间存在缝隙或气泡，样品在加样过程中可能会泄漏到相邻的孔中，导致样品交叉污染，无法准确分析各个样品的成分和特性。例如，在蛋白质电泳实验中，不同蛋白质样品的混合会使电泳条带变得混乱复杂，无法清晰分辨目标蛋白，严重干扰对蛋白质表达和纯度的判断。

此外，适配不佳还会使样品孔的形状不规则。这可能导致加样量不均匀，部分样品孔加样过多，而部分加样过少。在核酸电泳中，加样量的差异会使条带的亮度不一致，影响对核酸浓度的准确评估，甚至可能导致对核酸片段大小判断的失误，进而影响整个实验的结论可靠性。而且，不规则的样品孔还可能使样品在电泳初期的迁移受到阻碍，出现条带弯曲、拖尾等现象，进一步降低实验数据的质量。

二、可能导致适配不佳的原因

（一）梳子选择不当

1. 梳子规格不匹配

- 使用的梳子齿厚度与凝胶厚度不一致是常见的问题之一。如果梳子齿过厚，插入凝胶时会挤压凝胶，导致凝胶在梳子周围分布不均匀，形成凹陷或凸起，影响样品孔的完整性；反之，梳子齿过薄，则会在梳子与凝胶之间产生缝隙，容易造成样品泄漏。例如，对于较薄的凝胶（如 0.75mm 厚），使用了适用于 1.5mm 凝胶的梳子，就会出现明显的适配问题。

2. 梳子齿间距不合理

- 梳子齿间距应根据实验需求和样品数量来选择。如果齿间距过大，对于少量样品的电泳，会浪费凝胶空间，且可能使电场分布不均匀，影响条带的整齐度；而齿间距过小，在加样时容易出现样品溢出到相邻孔的情况，尤其是对于高浓度或粘性较大的样品。比如，在进行小规模的蛋白质纯度检测实验中，选择了齿间距过大的梳子，可能会导致条带变形和分辨率下降。

（二）凝胶制备问题

1. 灌胶操作不规范

- 灌胶速度过快是导致凝胶与梳子适配不佳的一个重要原因。快速灌胶会使凝胶在电泳槽内流动不均匀，产生气泡和漩涡，当梳子插入时，气泡容易被困在梳子与凝胶之间，影响样品孔的质量。此外，灌胶时没有将凝胶溶液充分填充到电泳槽的角落和边缘，也会导致凝胶在梳子周围的厚度不一致，使梳子无法紧密贴合凝胶。例如，在匆忙灌胶过程中，可能会忽略电泳槽底部的一些微小凹陷处，使得这些地方的凝胶厚度较薄，插入梳子后出现缝隙。

2. 凝胶凝固异常

- 凝胶的凝固过程受多种因素影响，如温度、催化剂和加速剂的用量等。如果凝胶凝固不完全，其内部结构不稳定，梳子插入时会使凝胶变形，导致样品孔形状不规则；而如果凝胶凝固过快，可能会在表面形成一层硬壳，阻止梳子完全插入，使梳子底部与凝胶之间存在间隙，影响样品的加样和分离效果。例如，在低温环境下，凝胶的凝固时间会延长，如果过早插入梳子，就容易出现上述问题。

（三）电泳槽问题

1. 电泳槽变形

- 电泳槽在使用过程中可能会受到碰撞、挤压或长时间放置不当等因素影响而发生变形。电泳槽的变形会导致其内部空间不均匀，使得凝胶在灌胶和凝固过程中无法形成平整的表面，从而影响梳子与凝胶的适配。例如，电泳槽的一侧受到外力撞击后出现凹陷，那么在这一侧灌胶时，凝胶的厚度就会变薄，插入梳子后会出现明显的缝隙。

2. 电泳槽清洁不彻底

- 残留的凝胶、样品或其他杂质在电泳槽内积累，如果没有及时清理干净，会影响新凝胶的灌胶效果和梳子的插入。杂质可能会附着在电泳槽表面，使凝胶无法均匀附着，或者在梳子插入时阻碍其与凝胶的紧密贴合，导致适配不佳。比如，上次电泳后残留的少量凝胶碎片留在电泳槽底部，在下次灌胶时，这些碎片会使凝胶在局部形成凸起，影响梳子的放置。

三、解决凝胶与梳子适配不佳的方法

（一）正确选择梳子

1. 匹配梳子规格

- 在进行电泳实验前，仔细查看电泳仪的说明书和凝胶的参数，选择与凝胶厚度完全匹配的梳子。一般来说，常见的凝胶厚度有 0.75mm、1.0mm 和 1.5mm 等，确保选择的梳子齿厚度与之相同，以保证梳子能够紧密插入凝胶，避免出现缝隙或挤压凝胶的情况。同时，根据样品数量和实验目的，合理选择梳子的齿数和齿间距。如果样品数量较少，可以选择齿数较少、齿间距较大的梳子，以节省凝胶和试剂；而对于需要高分辨率分离的样品，如核酸片段分析，应选择齿间距较小的梳子，但要注意避免加样时的样品溢出问题。

2. 试用和调整

- 在初次使用新的梳子或更换不同品牌、型号的梳子时，建议先进行试用。将梳子插入空的电泳槽中，观察梳子与槽底和槽壁的贴合情况，检查是否有松动、晃动或明显的缝隙。如果发现问题，可以尝试对梳子进行适当的调整或加工，如使用砂纸轻轻打磨梳子的边缘，使其更加平整光滑，以便更好地插入电泳槽和与凝胶适配。但在调整过程中要注意避免损坏梳子的结构和齿形，确保其正常使用功能。

（二）优化凝胶制备

1. 规范灌胶操作

- 灌胶时，要缓慢、匀速地将凝胶溶液倒入电泳槽中，避免产生气泡和漩涡。可以将移液器的枪头贴紧电泳槽内壁，沿着内壁缓慢滴加溶液，同时轻轻敲击电泳槽，使溶液均匀分布，并排出可能产生的气泡。灌胶速度不宜过快，一般控制在每分钟 5 - 10ml 左右，确保凝胶能够充分填充电泳槽的各个角落和边缘，形成平整、均匀的凝胶层。在灌胶接近满槽时，要更加小心操作，避免溶液溢出，同时要确保凝胶表面水平，可以使用水平仪放置在电泳槽边缘进行检查和调整。

2. 确保凝胶凝固正常

- 严格按照凝胶制备的操作规程，准确控制温度、催化剂和加速剂的用量，确保凝胶能够正常凝固。在制备凝胶时，选择合适的环境温度，一般在 20℃ - 25℃之间为宜。如果环境温度较低，可以适当增加催化剂（如过硫酸铵）和加速剂（如四甲基乙二胺）的用量，或者将电泳槽放置在恒温箱中进行凝胶的凝固；如果环境温度较高，则要减少催化剂和加速剂的用量，以防止凝胶凝固过快。同时，在凝胶凝固过程中，避免震动和干扰，让凝胶自然、均匀地凝固，形成稳定的内部结构，为梳子的插入提供良好的基础。

（三）维护电泳槽

1. 检查和修复电泳槽变形

- 定期检查电泳槽的外观，查看是否有变形、损坏的迹象。如果发现电泳槽有轻微变形，可以尝试使用工具进行修复，如对于小型的凹陷，可以使用钳子或锤子等工具轻轻敲打，使其恢复平整；对于较大的变形或损坏，可能需要更换电泳槽，以确保其内部空间的均匀性和稳定性，保证凝胶的灌胶效果和梳子的适配。在使用和存放电泳槽时，要注意避免碰撞和挤压，将其放置在安全、平稳的位置，延长电泳槽的使用寿命。

2. 彻底清洁电泳槽

- 每次电泳实验结束后，及时对电泳槽进行清洁。先用清水冲洗电泳槽，去除残留的凝胶和样品，然后使用温和的洗涤剂（如实验室专用的清洁剂或稀释后的洗洁精）进行清洗，注意要清洗到电泳槽的各个角落和缝隙，确保无杂质残留。最后用蒸馏水或去离子水冲洗干净，并将电泳槽倒置晾干或用干净的毛巾擦干。定期对电泳槽进行深度清洁，可以使用超声波清洗机等设备，进一步去除顽固的污垢和杂质，保持电泳槽的清洁度，为凝胶与梳子的良好适配创造条件。

四、预防适配不佳的措施

1. 建立标准化操作流程

- 制定详细、规范的 DYCZ - 24DH 型双板垂直电泳仪操作流程，包括梳子的选择、凝胶的制备、灌胶方法、电泳槽的维护以及实验后的清洁等各个环节，并严格按照流程进行操作。对实验室的操作人员进行培训，使其熟悉并掌握标准化操作流程，减少因操作不规范导致的凝胶与梳子适配不佳问题的发生。同时，在操作流程中明确规定定期检查和维护电泳仪的时间和方法，确保仪器始终处于良好的工作状态。

2. 做好实验前的准备和检查工作

- 在每次电泳实验前，仔细检查电泳槽、梳子和凝胶等实验用品的状态。查看电泳槽是否清洁、有无变形，梳子是否完好、规格是否合适，凝胶的质量和数量是否满足实验需求等。对发现的问题及时进行处理或更换，避免在实验过程中出现适配不佳的情况。此外，准备好备用的梳子和电泳槽等关键部件，以防在实验过程中出现意外情况时能够及时替换，保证实验的顺利进行。

3. 定期维护和校准仪器

- 除了日常的清洁和检查外，定期对电泳仪进行全面的维护和校准。包括检查电泳仪的电路连接是否正常、电源供应是否稳定、温度控制系统是否准确等，确保仪器的各项性能指标符合要求。同时，对电泳槽的尺寸和平整度进行校准，可以使用专业的测量工具（如卡尺、水平仪等）进行测量和调整，保证电泳槽的精度和稳定性，为凝胶与梳子的适配提供可靠的硬件基础。

五、总结

DYCZ - 24DH 型双板垂直电泳仪凝胶与梳子适配不佳是一个需要引起重视的问题，其成因涉及梳子选择、凝胶制备和电泳槽状态等多个方面。通过正确选择梳子、优化凝胶制备过程和加强电泳槽的维护，以及采取有效的预防措施，我们能够有效地解决凝胶与梳子适配不佳的问题，提高电泳实验的成功率和数据的准确性，为分子生物学研究提供有力的支持。在日常实验操作中，我们要注重细节，严格遵守操作规程，不断总结经验，确保电泳技术的顺利应用。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：