如何避免在制备凝胶时产生气泡？

作者：六一生物发布时间：2024-10-08 09:16:37 点击：

在使用DYCZ - 24A型双垂直电泳仪（或其他电泳设备）制备凝胶时，可通过以下方法避免产生气泡：

一、试剂准备阶段

1. 提前预热与脱气处理

- 对于一些在低温下容易结晶或溶解不完全的试剂，可以提前将其预热到适当温度，有助于完全溶解，减少因溶质未充分溶解而在后续搅拌中产生气泡的可能性。
- 对配制凝胶所用的溶液进行脱气处理。可以使用真空脱气法，将溶液置于真空容器中，抽出其中的空气。这是因为溶液中的空气在搅拌过程中容易形成气泡，脱气处理可从源头上减少气泡产生的根源。

2. 准确称量与缓慢混合

- 准确称量凝胶试剂，按照配方要求精确控制各成分的用量。不准确的称量可能导致某些成分过量或不足，影响凝胶的物理性质，并且在搅拌混合时更容易产生气泡。
- 在混合试剂时，要缓慢添加各成分，避免快速倾倒导致试剂之间相互冲击而卷入空气形成气泡。例如，在将丙烯酰胺溶液与其他缓冲液混合时，应沿着容器壁缓慢倒入，同时轻轻搅拌。

二、搅拌过程

1. 选择合适的搅拌工具与速度

- 使用合适的搅拌工具，如磁力搅拌子。磁力搅拌子的大小和形状要与容器匹配，较小的搅拌子在较大容器中可能无法充分搅拌，而过大的搅拌子可能会在搅拌时产生较大的漩涡，卷入空气形成气泡。
- 控制搅拌速度。搅拌速度不宜过快，一般以能使试剂充分混合但不产生明显漩涡为宜。如果搅拌速度过快，溶液会剧烈翻滚，容易将空气卷入溶液中形成气泡。例如，在配制聚丙烯酰胺凝胶时，磁力搅拌子的转速可控制在100 - 300转/分钟。

2. 搅拌方式

- 采用温和的搅拌方式，如上下颠倒或滚动混合。对于一些对搅拌要求不高且容易产生气泡的凝胶溶液，可以避免使用磁力搅拌或机械搅拌，而是采用手动上下颠倒容器或滚动容器的方式来混合试剂。这种方式可以减少空气的卷入，降低气泡产生的概率。

三、凝胶倒入阶段

1. 缓慢倾倒

- 在将配制好的凝胶溶液倒入制胶模具（如玻璃板之间的空隙）时，要尽可能缓慢。可以使用移液器或小口径的漏斗辅助倾倒，使凝胶溶液沿着模具壁缓缓流下。这样可以减少溶液在倒入过程中与空气的接触，避免空气被带入形成气泡。

2. 引流操作

- 如果是直接倾倒，可以使用玻璃棒进行引流。将玻璃棒一端贴在制胶模具的内壁上，然后让凝胶溶液顺着玻璃棒流下。这有助于稳定溶液的流动方向，减少溶液飞溅和空气的混入，从而防止气泡产生。

本文由北京六一生物编辑整理。

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