使用DYCZ - 28A单板夹芯式垂直电泳仪时的注意事项

作者：六一生物发布时间：2024-09-20 09:09:53 点击：

在生物实验领域，DYCZ-28A单板夹芯式垂直电泳仪是一款常用的实验设备。为了确保实验的顺利进行并获得准确可靠的结果，在使用DYCZ-28A单板夹芯式垂直电泳仪时需要注意以下诸多事项。

一、设备检查与维护方面

1. 电泳槽检查

- 在每次使用前，要仔细检查电泳槽的外观。查看槽体是否有裂缝或者破损之处，即使是微小的裂缝也可能导致缓冲液泄漏，从而影响电泳实验。如果发现电泳槽有损坏，应及时维修或更换。
- 检查电泳槽内部是否清洁，避免有残留的凝胶、缓冲液结晶或者其他杂质。这些杂质可能会干扰电场的分布，影响样本的迁移。可以使用温和的清洁剂和清水对电泳槽进行清洗，清洗后确保完全干燥再使用。

2. 电极维护

- 电极是电泳仪的关键部件。定期检查电极的表面状况，查看是否有生锈、腐蚀或者污垢附着。生锈和腐蚀会降低电极的导电性能，影响电泳过程中的电流稳定性。如果电极出现生锈或腐蚀现象，可以尝试用砂纸轻轻打磨，去除锈迹，然后用蒸馏水冲洗干净。
- 在安装电极时，要确保电极与电泳槽的连接紧密、牢固。松动的电极连接可能会导致接触不良，引起电流波动，甚至无法正常电泳。同时，要按照正确的极性连接电极，一般红色电极连接电源正极，黑色电极连接负极。

3. 玻璃板的注意事项

- 玻璃板的质量和状态对电泳结果有重要影响。玻璃板应保持平整、光滑，没有划痕或瑕疵。在使用前，要检查玻璃板是否清洁，如有污垢，可以用洗涤剂和清水清洗，然后用无水乙醇擦拭干净。
- 在安装玻璃板时，要注意正确的安装顺序和方法。确保两块玻璃板之间紧密贴合，没有气泡。如果玻璃板之间存在气泡，会导致凝胶不均匀，影响样本在凝胶中的迁移路径。

二、凝胶制备环节

1. 凝胶溶液配制

- 在配制凝胶溶液时，要严格按照配方准确称量各种试剂。试剂的用量不准确可能会导致凝胶的浓度不合适，从而影响样本的分离效果。例如，对于聚丙烯酰胺凝胶，丙烯酰胺和双丙烯酰胺的比例需要精确控制，以适应不同分子量样本的分离需求。
- 选择合适的试剂纯度也很重要。低纯度的试剂可能含有杂质，这些杂质会干扰凝胶的聚合反应或者影响样本的迁移。使用前要确保试剂在保质期内，并且保存条件符合要求。

2. 灌胶操作

- 灌胶时要缓慢、均匀地进行。如果灌胶速度过快，容易裹挟空气形成气泡，气泡会破坏凝胶的结构完整性，干扰样本的迁移。可以从玻璃板的一端开始灌胶，让凝胶溶液自然流淌，使空气能够顺利排出。
- 控制灌胶的高度。灌胶过高可能会导致凝胶在电泳过程中溢出，过低则可能使样本在电泳过程中跑出凝胶底部，无法得到完整的电泳结果。对于DYCZ - 28A单板夹芯式垂直电泳仪，聚丙烯酰胺凝胶一般灌胶至距离玻璃板顶部1 - 2厘米为宜。

三、样本处理与加样过程

1. 样本预处理

- 根据实验类型对样本进行正确的预处理。对于蛋白质样本，如果需要变性处理，要确保变性完全。不完全的变性可能会导致蛋白质在电泳中的迁移行为异常。在进行核酸电泳时，要确保核酸样本的纯度和完整性，避免样本降解。
- 准确测量和调整样本的浓度。样本浓度过高可能会在加样孔内堆积，无法正常进入凝胶迁移；浓度过低则可能导致电泳条带不清晰或者无法检测到。可以使用专业的定量方法，如蛋白质的Bradford法或BCA法，核酸的分光光度法等。

2. 加样操作

- 在加样时，使用微量移液器要准确吸取适量的样本。加样量既不能超过加样孔的容量，也不能过少。过多会溢出到相邻的加样孔，造成样本间的污染；过少则可能使电泳条带不明显。
- 加样时要缓慢、平稳地将样本注入加样孔，避免样本溅出或者产生气泡。如果样本中有气泡，可能会影响样本在凝胶中的迁移速度和方向。

四、电泳过程中的注意要点

1. 电源连接与参数设置

- 在连接电源时，要确保电极与电源的连接牢固，避免在电泳过程中出现松动。同时，要根据样本类型和实验目的合理设置电泳电压和时间。电压过高可能会使样本在凝胶中变形、弥散，电压过低则可能导致样本迁移过慢或者不完全。例如，在蛋白质SDS - PAGE电泳中，电压通常设置在80 - 120V，电泳时间1 - 3小时；核酸琼脂糖凝胶电泳电压可设置在100 - 150V，电泳时间30 - 60分钟。

- 在电泳过程中，要密切观察电泳槽内的情况，包括电流是否稳定、凝胶是否有异常发热等现象。如果电流波动较大或者凝胶过热，可能是电极连接不良、缓冲液不足或者凝胶存在短路等问题，需要及时停止电泳进行检查。

2. 避免震动和干扰

- 在电泳期间，要将电泳仪放置在平稳的位置，避免受到震动。震动可能会导致样本在凝胶中的迁移路径发生偏移，影响电泳结果的准确性。同时，要避免电泳仪周围存在强磁场或电场干扰，这些干扰可能会改变电泳过程中的电场分布，干扰样本的正常迁移。

五、实验结束后的处理

1. 安全关闭电源

- 当电泳完成后，首先要关闭电源开关，然后再拔掉电极插头。这一顺序可以避免在拔掉插头时产生电火花，保障实验人员的安全。

2. 凝胶处理

- 在取出凝胶时，要小心操作，避免损坏凝胶。如果使用玻璃板制作凝胶，可以使用专用的工具将玻璃板分开，然后轻轻取出凝胶。对于凝胶的后续处理，如染色、成像等操作，要按照相应的实验流程进行，避免过度处理导致凝胶变形或者电泳条带模糊。

使用DYCZ-28A单板夹芯式垂直电泳仪时，严格遵守这些注意事项是获得准确实验结果的关键。每一个环节都需要实验人员精心操作，以确保电泳实验的成功进行。

本文由北京六一生物编辑整理。

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