DYCZ-28A单板夹芯式垂直电泳仪使用全流程

作者：六一生物发布时间：2024-09-20 08:49:51 点击：

在生物化学和分子生物学的实验研究中，电泳技术是一种极为重要的分离和分析手段。DYCZ - 28A单板夹芯式垂直电泳仪以其独特的设计，在众多实验场景下发挥着关键作用。以下将详细介绍DYCZ - 28A单板夹芯式垂直电泳仪的使用全流程。

一、实验前的准备工作

1. 设备检查

- 取出DYCZ - 28A单板夹芯式垂直电泳仪，仔细查看电泳槽的外观。检查槽体是否有裂缝、破损等情况，因为这些可能会导致缓冲液泄漏，影响实验的正常进行。
- 检查电极的完整性，查看电极是否有生锈、腐蚀或接触不良的迹象。确保电极能够正常传导电流，这对于电泳过程至关重要。
- 对配套的玻璃板进行检查，玻璃板应平整、光滑且无划痕。任何瑕疵都可能影响凝胶的形成和电泳结果。

2. 材料准备

- 根据实验需求选择合适的凝胶类型，如聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶。如果是进行蛋白质的电泳分离，聚丙烯酰胺凝胶通常是较好的选择；对于核酸的分离，琼脂糖凝胶更为常用。
- 准备电泳缓冲液。例如，对于聚丙烯酰胺凝胶电泳，可能会用到Tris - 甘氨酸缓冲液；对于琼脂糖凝胶电泳，TAE（Tris - 乙酸 - EDTA）或TBE（Tris - 硼酸 - EDTA）缓冲液是常见的选择。按照精确的配方进行缓冲液的配制，确保使用去离子水，以避免杂质离子对电泳的干扰。
- 处理实验样本。对于蛋白质样本，可能需要进行提取、纯化、变性等预处理步骤；对于核酸样本，则需要进行提取、定量等操作，确保样本处于适合电泳的状态。

二、玻璃板的安装与处理

1. 清洗玻璃板

- 将玻璃板从电泳仪中取出，用温和的洗涤剂和温水清洗玻璃板表面，去除可能存在的油污、灰尘等杂质。
- 用大量的清水彻底冲洗玻璃板，确保洗涤剂完全被清除，然后用无水乙醇擦拭玻璃板，使玻璃板干燥且洁净。

2. 安装玻璃板

- 将一块玻璃板平放在干净的实验台上，在其边缘放置配套的密封胶条或塑料夹条，确保胶条与玻璃板紧密贴合。
- 然后，将另一块玻璃板覆盖在上面，形成一个夹心结构。在安装过程中，要注意避免玻璃板之间产生气泡，可以轻轻按压玻璃板来排除气泡。

三、灌胶操作

1. 凝胶溶液的制备

- 如果选择聚丙烯酰胺凝胶，根据目标蛋白质的分子量大小确定合适的凝胶浓度。按照配方准确称量丙烯酰胺、双丙烯酰胺、Tris等试剂，加入适量的去离子水，搅拌均匀。然后加入催化剂（如过硫酸铵）和加速剂（如TEMED），迅速搅拌，但要尽量避免产生过多气泡。
- 对于琼脂糖凝胶，根据核酸片段的大小确定琼脂糖的浓度。称取适量的琼脂糖粉末，加入到一定体积的电泳缓冲液中，在微波炉或加热板上加热溶解，期间要不断搅拌，确保琼脂糖完全溶解。

2. 灌胶

- 将制备好的凝胶溶液缓慢倒入安装好的玻璃板之间的空隙中。从一侧开始，让凝胶溶液自然流淌，确保凝胶均匀分布，避免产生气泡。对于聚丙烯酰胺凝胶，灌胶至距离玻璃板顶部约1 - 2厘米处停止；琼脂糖凝胶则灌至足够覆盖电泳梳子的齿即可。

四、梳子的插入与凝胶凝固

1. 插入梳子

- 在凝胶溶液尚未完全凝固之前（对于聚丙烯酰胺凝胶，通常在灌胶后几分钟内；琼脂糖凝胶则在溶液温度降至约50 - 60°C时），将梳子轻轻插入凝胶溶液中。梳子的齿要垂直向下，并且要确保梳子插入的深度一致，这样可以在凝胶中形成整齐的加样孔。

2. 凝胶凝固

- 让凝胶在室温下自然凝固。聚丙烯酰胺凝胶凝固时间相对较长，可能需要30 - 60分钟；琼脂糖凝胶凝固速度较快，一般15 - 30分钟即可完全凝固。

五、样本准备与加样

1. 样本处理

- 蛋白质样本如果经过变性处理，要确保变性完全且浓度合适。可以使用Bradford法或BCA法等对蛋白质样本进行定量，然后调整样本的浓度使其在合适的范围内。
- 核酸样本要确保纯度和浓度符合要求。可以通过分光光度计等仪器对核酸进行定量和纯度检测，必要时进行稀释或浓缩处理。

2. 加样

- 当凝胶完全凝固后，小心地拔出梳子，此时在凝胶中会留下加样孔。
- 使用微量移液器吸取适量的样本，缓慢地将样本加入到加样孔中。注意加样的体积要适中，不要超过加样孔的容量，同时要避免样本溢出到相邻的加样孔中。

六、电泳过程

1. 连接电极

- 将电泳槽的电极与电源正确连接。一般来说，红色电极连接电源的正极，黑色电极连接负极。确保电极连接牢固，没有松动或接触不良的现象。

2. 设置电泳参数

- 根据样本的类型和实验目的设置合适的电泳电压和时间。对于蛋白质的SDS - PAGE电泳，电压通常设置在80 - 120V，电泳时间1 - 3小时；对于核酸的琼脂糖凝胶电泳，电压可设置在100 - 150V，电泳时间30 - 60分钟。

3. 开始电泳

- 打开电源开关，开始电泳。在电泳过程中，要注意观察电泳槽内的情况，如电流是否稳定、凝胶是否有异常发热等现象。如果发现电流突然增大或减小、凝胶过热等问题，应立即停止电泳，检查原因并进行调整。

七、实验结束后的处理

1. 关闭电源

- 当电泳达到预定的时间后，先关闭电源开关，然后再拔掉电极插头，以确保安全。

2. 取出凝胶

- 小心地将玻璃板从电泳槽中取出，用专用的工具将玻璃板分开，取出凝胶。

3. 后续分析

- 根据实验的目的对凝胶进行染色、显色等处理，以观察电泳的结果。对于蛋白质凝胶，可以采用考马斯亮蓝染色或银染等方法；对于核酸凝胶，可以使用溴化乙锭（EB）或其他安全的核酸染料进行染色，然后在凝胶成像系统中观察和分析电泳条带。

八、注意事项

1. 安全问题

- 在操作电泳仪的过程中，要避免接触电极和电泳液，防止触电事故的发生。
- 电泳过程中可能会产生热量，注意不要触摸电泳槽以免烫伤。

2. 实验环境

- 保持实验环境的清洁和稳定。灰尘、杂质等可能会影响实验结果，所以要尽量减少环境中的灰尘和杂质。
- 控制实验环境的温度和湿度，避免温度过高或过低、湿度过大或过小对实验的影响，尤其是在凝胶的制备和凝固过程中。

3. 操作规范

- 严格按照操作步骤进行操作，不要随意更改实验条件和操作流程。
- 在灌胶、加样等过程中，要尽量避免产生气泡，因为气泡可能会影响样本的迁移和实验结果。

DYCZ - 28A单板夹芯式垂直电泳仪的使用需要细心和耐心，遵循正确的操作流程和注意事项，才能确保获得准确、可靠的实验结果。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：